Effects of puerarin on proliferation of vascular smooth muscle cells induced by thrombin

目的 观察葛根素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,对原癌基因c-fos和bcl-2蛋白质以及凝血酶受体(TR)mRNA表达的作用.方法以细胞计数法,流式细胞仪测定DNA含量,细胞周期分析法观察凝血酶及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响.在凝血酶及葛根素作用24 h后,用Western印迹法检测c-fos和bcl-2蛋白表达,以半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TR mRNA的表达.结果凝血酶对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在24 h末达峰值(细胞计数凝血酶组8.64×104/ml±0.12×104/ml,对照组4.20×104/ml±0.11×104/ml,P<0.05),且凝血酶浓度在0.1～1.0 U/L之间呈剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制凝血酶诱导的细胞增殖、DNA合成以及VSMC c-fos和bcl-2蛋白的表达(葛根素浓度为1.5×10-3 mol/L时,抑制率分别为42.6%±5.2%、58.2%±7.9%、44.5%±7.5%和39.6%±6.4%,均P<0.05);高浓度(1.5×10-3 mol/L)的葛根素可显著抑制凝血酶诱导的TR mRNA上调(抑制率为17.6%±1.7%, P<0.05).结论葛根素能抑制凝血酶诱导的VSMC增殖,这可能与其抑制c-fos和bcl-2蛋白有关,并部分与其抑制TR mRNA表达有关。