Differentiation of CD34+ hematopoietic stem cells into hepatocyte-like cells in vivo

目的 观察人脐血CD34+造血干细胞移植后在体内向肝样细胞分化的情况.方法 CD34+造血干细胞分离自足月妊娠产妇脐血,实验动物采用6～8周的非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷(nonobese diabetic/severe combined immunodeficiency disease,NOD/SCID)小鼠,20 μl CCl4腹腔注射建立小鼠急性肝损伤模型,其中部分小鼠24 h后通过尾静脉注射入肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的裸DNA质粒,建模48 h后将CD34+造血干细胞通过尾静脉注入小鼠体内,观察各组死亡率、肝功能恢复情况,并通过RT-PCR、免疫组化、FISH等手段检测小鼠肝组织内人源性的、分泌白蛋白的肝样细胞.结果 实验各组之间肝功能恢复无明显差异.各组存活率相近.肝组织石蜡切片显示,同时注射HGF质粒及CD34+造血干细胞的实验组,其肝组织损伤程度最轻,单独注射HGF质粒或CD34+造血干细胞的两个实验组结果相近,对照组最重.在注射CD34+造血干细胞的两组小鼠肝组织中,通过RT-PCR、免疫组化、FISH等方法均可检测到人源性的肝样细胞,联合应用HGF的实验组中,此种分化细胞数量更多,分布更广.另外与此同时可观察到融合细胞的存在.结论 脐血中CD34+的造血干细胞可以分化成肝样细胞,HGF可以促进这一分化进程。