MAPK/PKC信号通路在原癌基因c-erbB2调控原始卵泡启动生长中的作用

本研究旨在探讨原癌基因c-erbB2在原始卵泡启动生长中的调控作用,及其在信号通路中与丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）和蛋白激酶C（protein kinaseC,PKC）的上下游关系。实验通过脂质体介导c-erbB2siRNA转染体外培养的卵巢,用RT-PCR法检测原癌基因c-erbB2 mRNA的表达,用Western blot检测ErbB2、MAPK和PKC蛋白的表达;用MAPK及PKC通路特异性抑制剂PD98059和Calphostin加入培养液中,培养卵巢8d后检测c-erbB2 mRNA及ErbB2蛋白的表达;HE染色进行卵泡启动生长组织学观察。结果显示,c-erbB2siRNA转染卵巢后,c-erbB2 mRNA水平明显下调（P〈0.01）,ErbB2、MAPK和PKC蛋白的表达也明显下调（P〈0.01）;而在培养液中加入特异性抑制剂PD98059和Calphostin,卵巢c-erbB2 mRNA的表达和ErbB2蛋白表达均无明显变化（P〉0.05）;与对照组比较,培养8d后siRNA组初级卵泡和次级卵泡数明显减少（P〈0.01）,抑制剂组原始卵泡数增多（P〈0.01）,次级卵泡数明显减少（P〈0.05或P〈0.01）。以上结果提示,c-erbB2可能是调控原始卵泡启动生长中的蛋白激酶MAPK和PKC的上游激活物。