小鼠CD45 - /CD31 + 肺侧缘细胞诱导分化为血管平滑肌细胞的体外培养

目的探讨在体外诱导分化CD45-/CD31+肺侧缘细胞的特性。方法取小鼠肺组织，流式细胞术分选小鼠CD45-/CD31+肺侧缘细胞；免疫荧光检测其侧缘细胞表型标记物ATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)和干细胞表面标记物干细胞抗原1(stem cell antigen 1,Sca1)的表达,逆转录PCR检测其ABCG2、平滑肌细胞标志物平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin, SMA)及血管平滑肌细胞标志物α-血管平滑肌原肌球蛋白（α-SMT）表达。分选的CD45-/CD31+肺侧缘细胞体外培养14 d后，细胞克隆形成实验和流式细胞术对其进行鉴定。分选的CD45-/CD31+肺侧缘细胞体外诱导14 d后，免疫荧光检测细胞α-SMT的表达，逆转录-PCR检测分化诱导前后细胞中的ABCG2、SMA及α-SMT基因表达。结果成功分选出目的细胞群CD45-/CD31+肺侧缘细胞，其表达ABCG2 和Sca1蛋白，ABCG2和SMA基因，不表达α-SMT基因。细胞体外培养14 d后，出现的细胞克隆鉴定为CD45-/CD31+肺侧缘细胞。CD45-/CD31+肺侧缘细胞分化诱导前表达ABCG2，少量表达SMA，不表达α-SMT，分化诱导14 d后表达α-SMT基因和蛋白、SMA基因，不表达ABCG2基因。结论CD45-/CD31+肺侧缘细胞是血管平滑肌细胞的祖细胞，具有干细胞分化特性。在体外培养可分化为血管平滑肌细胞。