Resistencia a carbapenemes en aislamientos de Pseudomonas aeruginosa: un ejemplo de interacción entre distintos mecanismos

OBJETIVO: Identificar la proteina de membrana externa ausente en los aislamientos resistentes y determinar tanto las causas de su ausencia en la membrana, como la presencia de otros mecanismos de resistencia a carbapenemes en aislamientos clinicos de Pseudomonas aeruginosa. METODOS: Se estudio un brote de 20 aislamientos de P. aeruginosa previamente caracterizados como productores de la metalobetalactamasa IMP-13. Estos aislamientos presentaron igual expresion de la enzima IMP-13, pero solo cinco de ellos fueron resistentes a carbapenemes. En esos cinco aislamientos resistentes se confirmo la ausencia de una proteina de membrana externa. Se secuenciaron oprD y ampC; se identificaron las proteinas de membrana externa por desorcion/ionizacion laser asistida por matriz/espectometria de masa tiempo de vuelo (MALDI-TOF); se determino el nivel de expresion de oprD, de AmpC y de los sistemas de eflujo tipo Mex, por reaccion en cadena de polimerasa en tiempo real, y por ultimo, se determino la contribucion del deficit de oprD a la resistencia a carbapenemes. RESULTADOS: La proteina de la membrana externa ausente en el grupo R (resistentes a ambos carbapenemes) fue identificada como OprD-TS, pero no se observaron variaciones en su expresion. El gen oprD presento mutaciones en los cinco aislamientos resistentes. Se observo la misma produccion de la enzima tipo AmpC PDC-5 y del sistema de eflujo Mex AB-OprM entre los aislamientos sensibles y resistentes a carbapenemes. Se analizo como la presencia conjunta de IMP-13 y el deficit de oprD contribuyen al aumento de la resistencia. CONCLUSIONES: Distintos mecanismos contribuyen a la resistencia de aislamientos productores de IMP-13 a carbapenemes. La posibilidad de no detectar estos aislamientos productores de IMP-13 representa un riesgo latente de seleccion de mutantes con mecanismos de resistencia que se suman para aumentar la resistencia a carbapenemes.