Immunomodulation thérapeutique dans un modèle de mélanome : Potentiel de mutants du virus de la stomatite vésiculaire et influence du système du complément.

Le cancer est une maladie multifactorielle difficile a traiter. En effet, les cellules tumorales ont acquis des mutations leur permettant entre autres de s’evader du systeme immunitaire. Cette tolerance immunitaire est alors extremement complexe a briser. La virotherapie oncolytique est un moyen de plus en plus etudie dans le but d’induire un etat pro-inflammatoire au site tumoral en lysant les cellules cancereuses. Ceci permet alors la reconnaissance d’antigenes tumoraux en presence des signaux d’activation adequats afin de monter une reponse immunitaire antiturnorale. L’objectif global de ce projet est de caracteriser l’immunomodulation therapeutique induite par divers mutants du virus de la stomatite vesiculaire et determiner comment potentialiser la reconnaissance de cellules cancereuses par le systeme immunitaire dans le modele de melanome murin B16gp33. Afin de permettre l’etude des mecanismes immunitaires impliques lors de l’oncolyse virale, nous avons caracterise differents mutants de la glycoproteine d’enveloppe et de la proteine de la matrice du VSV ayant des proprietes oncolytiques diverses sur le melanome. Nous avons ensuite pu etablir que les virus plus cytopathiques induisent une meilleure reponse immunitaire contre l’epitope exogene gp33 tandis que le mutant attenue MM5IR permet un bris de tolerance plus large avec l’etablissement d’une reponse immunitaire contre des antigenes tumoraux varies. Nous avons egalement demontre que, bien que n’influencant pas la virotherapie, une inhibition transitoire du systeme du complement contribue a une immunomodulation antitumorale via l’action des cellules NK. Ce projet de these met donc en relief la possibilite d’influencer le systeme immunitaire a reconnaitre a nouveau les cellules tumorales soit par l’action d’agents dynamiques comme le VSV ou en ciblant directement des intervenants du systeme immunitaire. Abstract Cancer is a multifactorial disease difficuit to treat. Jndeed, tumor celis have acquired mutations allowing them, among other things, to evade from the immune system. This unmune tolerance is then extremely hard to break. Oncolytic virotherapy is a way increasingly studied in order b induce a pro-inflarnrnatory state at the tumor site by lysing cancer celis. This allows the recognition of tumor antigens in the presence of appropnate activation signais to mount an antiturnor immune response. The overali objective of this project is to charactenze the therapeutic immunomodulation mduced by various mutants of vesicular stomatitis virus and 1mw to potentiate the recognition of cancer celis by the immune system in the murine melanoma model B16gp33. To enable the study of immune rnechanisrns involved in viral oncolysis, we characterized different mutants of the envelope glYcoprotein and the matrix protein of VSV which have varicus oncolytic properties in melanorna ceils. We then established that cytopathic viruses induce a better immune response against the gp33 exogenous epitope while the attenuated mutant MM5 . allows a wider tolerance break with the establishment of an immune response against a variety of tumor antigens. We also demonstrated that, although flot influencing virotherapy, a transient inhibition of the complement system contrihutes to antitumor immunomodulation through the action of NK ceils. Globally, this thesis focuses on the ability to influence the immune system to recognize tumor celis hy the action