Let-7i抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 ：探讨let-7i对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭和顺铂（cisplatin,DDP）耐药性的影响及可能的作用机制。方法：应用实时荧光定量PCR检测人永生化卵巢细胞IOSE、卵巢癌SKOV3细胞和卵巢癌DDP耐药细胞SKOV3/DDP中let-7i的表达。将let-7i过表达质粒（let-7i）、抑制let-7i表达质粒（anti-let-7i）和阴性对照（negative control,NC）质粒（let-7i-NC）分别转染SKOV3细胞后,应用Ed U（5-ethynyl-2’-deoxyuridine）实验、划痕愈合实验和Transwell侵袭实验分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。用不同浓度的DDP处理转染了let-7i质粒的SKOV3/DDP细胞后,MTT法检查SKOV3/DDP细胞对DDP敏感性的变化。应用Target Scan、mi Randa和Pic Tar靶基因预测软件以及DAVI（D Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery）数据库对let-7i进行生物信息学分析,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测let-7i和anti-let-7i转染组SKOV3细胞中let-7i潜在靶基因Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）m RNA和蛋白的表达水平。结果 ：SKOV3细胞中let-7i的表达水平低于IOSE细胞（P〈0.01）,而SKOV3/DDP细胞中let-7i的表达水平低于SKOV3细胞（P〈0.01）。Let-7i转染组SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降（P〈0.05、P〈0.01和P〈0.05）,而anti-let-7i转染组SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力的改变不显著（P值均〉0.05）。转染let-7i质粒后,SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性增强（P〈0.05）。生物信息学分析表明,let-7i的靶基因主要富集于丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）信号通路、转化生长因子-β（transforming growth factor-beta,TGF-β）信号通路和黏着斑通路等。Let-7i转染组SKOV3细胞中TLR4 m RNA和蛋白的表达水平下调（P值均〈0.05）。结论 ：卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞中let-7i低表达。Let-7i过表达可抑制SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力,增强SKOV3/DDP细胞对DDP的�