SF2/ASF e SRPK2 : relação entre a maquinaria de splicing alternativo e o desenvolvimento da leucemia

O processo de splicing do RNAm e responsavel por orquestrar a juncao de exons, criando uma grande diversidade de isoformas genicas. Alteracoes nos componentes da maquinaria de splicing e, consequentemente, no processamento do pre-RNAm podem causar ou contribuir para uma infinidade de doencas, dentre elas o câncer. A proteina SF2/ASF foi o primeiro fator de splicing a ser caracterizado como proto-oncogenico, estando superexpresso em diferentes tipos de neoplasias. Sabe-se que a ativacao desse fator e, principalmente, mediada por SR quinases conhecidas como splicing quinases e pertencentes a familia das SRPKs. A quinase SRPK1, responsavel pela fosforilacao de SF2/ASF no citoplasma, tem conhecida superexpressao em leucemias. Ja a quinase SRPK2, paraloga a SRPK1, possui relacao ja demonstrada com a proliferacao de celulas leucemicas e com sua diferenciacao. Diante desse quadro, buscamos nesse estudo possiveis correlacoes entre a maquinaria de splicing e o câncer, dando enfoque a relacao entre essa maquinaria e a leucemia. Para tanto, buscamos alteracoes no cDNA de SRPK2 e quantificamos a expressao das SR quinases SRPK1, SRPK2 e CLK1 em diferentes linhagens de leucemia. Alem disso, avaliamos, usando o sistema de Exon Array (Affymetrix), o efeito da superexpressao do fator de splicing SF2/ASF em celulas de mamifero, buscando alteracoes globais no splicing dessas celulas capazes de explicar o carater oncogenico do fator. Foram encontradas nesse estudo duas novas isoformas de SRPK2, isoladas a partir do cDNA das linhagens de leucemia estudadas. Tambem foi observada a expressao diferencial das SR quinases SRPK1 e SRPK2 nas linhagens leucemicas de origem linfoide e mieloide, dando indicios sobre um possivel papel divergente dessas quinases nos diferentes tipos de leucemia. Alem disso, nas analises preliminares do conjunto de dados obtidos no experimento de Exon Array, foi possivel tracar importantes consideracoes sobre seu carater oncogenico. Esses dados preliminares do experimento de Exon Array, somados as demais alteracoes encontradas nas SR quinases, fornecem novas e interessantes pistas sobre a relacao entre alteracoes na maquinaria de splicing e a oncogenese. Abstract