Effect of salicylic acid and silver nitrate on rutin production by Hyptis marrubioides cultured in vitro

EnglishHyptis marrubioides (Lamiaceae) is a medicinal plant that is native from Brazilian Cerrado. In vitro propagation techniques make use of elicitors to alter metabolic pathways, affecting how molecules are produced both qualitatively and quantitatively. This research aimed to evaluate how abiotic elicitors salicylic acid (SA) and silver nitrate (SN) at concentrations of 30µM or 60µM influence Hyptis marrubioides seedling growth by two different in vitro culture methods. The rutin content was quantified by HPLC-DAD. Compared to an untreated culture, the H. marrubioides methanolic extracts cultured in MS medium for 10 days followed by culture in MS medium containing SN (30µM) for 20 days had 1.28 times higher rutin content. In a second experiment, seedlings were cultured in MS medium for 20 days, and then the desired elicitor was added to the culture and allowed to remain in contact with the medium for three and six days. SA (30µM) gave the best results: rutin production was 16.56-foldhigher than the control after six days. SN (30µM) increased the rutin content by 1.17-fold. At the two concentrations evaluated during the elicitation experiments, neither SA nor SN altered the growth parameters shoot length, leaf number, and fresh and dry weight of H. marrubioides seedlings grown in vitro as compared to the control. Based on these results, the abiotic elicitors SA and SN successfully provide Hyptis marrubioides with increased rutin content in vitro. Key words: salicylic acid; HPLC-DAD; tissue culture; silver nitrate; elicitation; plant growth regulators portuguesHyptis marrubioides (Lamiaceae) e uma planta medicinal nativa do Cerrado brasileiro. Tecnicas de propagacao in vitro fazem uso de elicitores para alterar as vias metabolicas, afetando a producao de moleculas qualitativa e quantitativamente. Este trabalho teve como objetivo avaliar como os elicitores abioticos acido salicilico (SA) e nitrato de prata (SN) nas concentracoes de 30µM ou 60µM influenciam no crescimento de plântulas de Hyptis marrubioides por dois diferentes metodos de cultivo in vitro. O teor de rutina foi quantificado por CLAE-DAD. Em comparacao com uma cultura nao tratada, os extratos metanolicos de H. marrubioides cultivados em meio MS por 10 dias, seguidos de cultura em meio MS contendo SN (30µM) por 20 dias, apresentaram 1,28 vezes maior teor de rutina. Em um segundo experimento, as plântulas foram cultivadas em meio MS por 20 dias, e entao o elicitor desejado foi adicionado a cultura e deixado em contato com o meio por tres e seis dias. SA (30µM) forneceu os melhores resultados na producao de rutina, sendo 16,56 vezes maior do que o controle apos seis dias. SN (30µM) aumentou o teor de rutina em 1,17 vezes. Nas duas concentracoes avaliadas durante os experimentos de elicitacao, nem SA nem SN alteraram os parâmetros de crescimento, como comprimento da parte aerea, numero de folhas ou peso fresco e seco das plântulas de H. marrubioides cultivadas in vitro em relacao ao controle. Com base nestes resultados, os elicitores abioticos SA e SN forneceram com sucesso Hyptis marrubioides in vitro com maior conteudo de rutina. Palavras-chave: acido salicilico; CLAE-DAD; cultura de tecidos; elicitacao; nitrato de prata; reguladores de crescimento vegetal