重组人BMP-2/壳聚糖/硫酸葡聚糖复合微球诱导异位成骨的micro-CT评价

目的采用micro-CT评价重组人BMP-2/壳聚糖/硫酸葡聚糖（recombinant human BMP-2/chitosan/dextran sulfate,rhBMP-2/CS/DS）复合微球诱导异位成骨情况。方法采用离子交联法制作rhBMP-2/CS/DS复合微球,扫描电镜观察其形态,ELISA法检测微球体外缓释效应。取6-8周龄雄性SD大鼠48只,随机分为4组（n=12）;制备股四头肌肌袋模型后,分别将相同体积明胶海绵（A组）、CS/DS微球（B组）、rhBMP-2（C组）及rhBMP-2/CS/DS复合微球（D组）植入肌袋肌间隙中。术后观察大鼠一般情况;于4、8、12、16周处死动物,取异位骨化组织块行micro-CT扫描及三维重建,检测组织骨密度（tissue mineral density,TMD）、骨体积分数（bone volume fraction,BVF）、骨小梁厚度（trabecular thickness,Tb.Th）、骨小梁数量（trabecular number,Tb.N）、皮质骨骨密度（bone mineral density,BMD）及组织矿含量（tissue mineral content,TMC）。结果扫描电镜观察示,制备的rhBMP-2/CS/DS复合微球球形较规整,分散较均匀,无团聚,微球表面较光滑;微球体外释放rhBMP-2于2 h后出现1个突释放期,2 d时达峰值,释放周期约20 d。各组大鼠均存活至实验完成,术后各时间点,A、B组CT扫描均未见放射性显影,三维重建未发现成骨;而C、D组放射性显影强度及三维重建骨组织逐渐增加,且D组强于C组。各时间点A、B组TMD、BVF、Tb.Th、Tb.N、BMD及TMC均为0。随时间延长,C、D组除Tb.N外,其余骨组织参数均呈总体增加趋势,各时间点与A、B组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;C、D组间4周时比较差异无统计学意义（P〉0.05）,8-16周时D组显著高于C组,比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 rhBMP-2/CS/DS复合微球异位诱导成骨能力显著强于单独rhBMP-2。