1-磷酸鞘氨醇后适应对人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究1磷酸鞘氨醇（S1P）后适应对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）缺氧/复氧损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法建立HUVEC缺氧/复氧损伤模型,将HUVEC细胞分为5组,正常对照组、S1P低剂量组、S1P中剂量组、S1P高剂量组以及缺氧/复氧损伤（H/R）组.MTT法检测细胞存活率;流式细胞术分析测定细胞凋亡率;比色法测定细胞培养液中总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）、铜锌超氧化物歧化酶（copper/zinc superoxi dedis-mutase,CuZn-SOD）和锰超氧化物歧化酶（manganese superox-ide dismutase,Mn-SOD）活力以及一氧化氮（nitricoxide,NO）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;荧光显微镜下观察线粒体膜电位;Westernblot测定HUVECs细胞Bcl-2/Bax、eNOS蛋白的表达水平.结果与H/R组相比,S1P低、中、高剂量组可明显增加HUVECs细胞缺氧/复氧损伤后细胞存活率;均明显升高T-SOD活力、CuZnSOD活力、Mn-SOD活力,降低MDA含量,明显升高NO含量及增加eNOS蛋白表达,降低凋亡率,抑制线粒体膜电位下降.结论S1P能够使H/R损伤的HUVECs细胞凋亡率降低,且呈一定的浓度依赖性.S1P对H/R损伤的HUVECs细胞凋亡的保护作用可能与降低细胞内MDA含量,提高细胞内SOD活力,提升线粒体膜电位,增强抗凋亡蛋白Bcl-2/Bax的表达有关.