Purificación, caracterización y demostración de la función acarreadora de la Glutación S-transferasa de Taenia crassiceps

Los objetivos de este trabajo fueron purificar, caracterizar en forma parcial y evaluar la funcio´n de ligandina o acarreadora de la glutatio´n S-transferasa de cisticercos de Taenia crassiceps (GSTTc). Lac GSTTc se purifico´ en forma homoge´nea 525 veces con un rendimiento del 1,4%. Para tal fin se empleo´ una croinatografi´a de afinidad para glutatio´n y un croinatoenfoque en una resina intercambiadora de poliamortiguadores (PBE 94). La GSTTc mostro´ ser una enzima diine´rica con una Mr 54.000 y subunidades de Mr 27.000. Su pH o´ptimo de reaccio´n fue de 7,5 y fue estable en un rango de pH 5,743. La enzima incremento´ su actividad a partir de 10°C hasta 35°C y posteriormente la decreinento´ hasta cero a los 75°C. La GSTTc presento´ una actividad especi´fica de 360,0.052,0.134 y 0.42 pM inin-� mg-� para el 1-cloro-2,4- dinitrobenceno, 1, 2-dicloro 4 nitrobenceno, a´cido etacrinico y trans-non-2-enal respectivamente, pero no presento´ actividad para bromosulftaleina (BST), hexa-2,4 dienal, 1,2-epoxi-3-(p-nitrofenoxi) propano e hidropero´xidos. Cuando se uso´ el 1-cloro-2,4-dinitrobencencoo ino sustrato se obtuvo una Km(= 0,36 % 0,03 inM y un ,a, ,V, , (max = 1,73 h 0,57 pino1 min-l ing-� y al emplear al glutatio´n resulto´una I