Cell Fractionation of Lamb Uterus in Non-Aqueous Media and Nuclear Compartmentation of the Oestrogen Receptor

Summary The oestrogen receptor of immature freeze-dried and homogenized lamb uterus is easily extracted from cellular fractions, including nuclei, after centrifugation in cyclohexane/carbon tetrachloride mixtures of different density. Indications for the predominant occurrence of the receptor in nuclei are given. Its affinity to 3H-17β-oestradiol remains unimpaired by this treatment and is comparable to that of receptor fractions prepared by the aqueous technique. Zusammenfassung Zellfraktionierung von Lammuterus in wasserfreiem Medium und intrazellulare Verteilung des Ostrogenrezeptors Nach Homogenisation gefriergetrockneter Lammeruteri sowie Zellfraktionierung durch Zentrifugation in unpolaren Tetrachlorkohlenstoff/Cyclohexan-Gemischen unterschiedlicher Dichte ist der Ostrogenrezeptor aus allen subzellularen Fraktionen leicht zu extrahieren. Der Rezeptor findet sich dabei vorwiegend in den Zellkernen. Seine Affinitat zu 3H-17β-Ostradiol bleibt bei dieser Fraktioniertechnik voll erhalten. Resume Fractionnement cellulaire d'uterus d'agneaux dans un milieu sans eau et repartition intracellulaire des recepteurs d'œstrogene L'extraction du recepteur d'œstrogene a partir de toutes les fractions subcellulaires est facile apres une homogeneisation d'uterus lyophilises d'agneaux et apres un fractionnement cellulaire par une centrifugation dans des melanges non polaires de densite differente fait de tetrachlorure de carbone/cyclohexane. Le recepteur est situe principalement dans les noyaux cellulaires. Son affinite pour 3H-17β-œstradiol demeure intacte avec cette technique de fractionnement. Resumen El fraccionamiento de las celulas de uteros de cordera en medio no acuoso y el compartimiento intracelular del receptor de estrogeno Tras la homogeneizacion de uteros liofilizados de corderas asi como el fraccionamiento celular mediante centrifugacion en mezclas no polares de tetracloruro de carbono/ciclohexano, de densidades diferentes, se puede extraer con facilidad el receptor de estrogeno de todas las fracciones subcelulares. Asi se halla el receptor, sobre todo, en los nucleos celulares. Con esta tecnica de fraccionamiento permanece intacta su afinidad para con 3H-17β-oestradiol.