Amélioration des conditions de cryopréservation des hépatocytes par culture tridimensionnelle

Ce travail presente une etude effectuee sur la conservation d'hepatocytes par cryopreservation. Les pertes cellulaires associees aux techniques actuelles sont extremement elevees, d'ou l'idee d'utiliser une technique de culture cellulaire tridimensionnelle qui permet une recuperation structurelle et fonctionnelle des cellules isolees, donc une meilleure resistance a un cycle de cryopreservation. Des procedures d'isolement, de purification et de culture cellulaire en trois dimensions ont ete acquises. Des evaluations structurelles et metaboliques montrent que nos hepatocytes sont fonctionnels. Ces resultats sont tres satisfaisants, et ont d'autres applications potentielles, comme par exemple les therapies cellulaires ou geniques. Sur la base d'une revue approfondie de la litterature medicale et physique sur les problemes rencontres lors des cycles de refroidissement et de rechauffement, des protocoles de cryopreservation en suspension puis en cultures tridimensionnelles ont ete elabores. Les resultats obtenus sont insatisfaisants, avec un taux de destruction des cultures prohibitif, lie principalement au rechauffement des cultures.