Avaliação de cromatina de espermatozoides bovinos usando análise de imagem computacional de esfregaços corados com azul de toluidina e o citômetro de fluxo (SCSA)

A capacidade de fecundacao dos espermatozoides esta relacionada a alguns aspectos funcionais importantes, como a motilidade progressiva, capacitacao, reacao acrossomal e habilidade de ligacao e penetracao no ovocito e posterior desenvolvimento embrionario. O objetivo deste estudo foi realizar a comparacao entre dois metodos distintos de avaliacao de cromatina espermatica. Uma vez que alteracoes em nivel de DNA espermatico nao interferem em grande escala na fecundacao de ovocitos, mas sim em seu desenvolvimento ate o estagio de blastocisto. Por meio do metodo de analise computacional de esfregacos corados em azul de toluidina (AT) e tambem pelo metodo de citometria de fluxo (SCSA) foram avaliados ejaculados de dois touros pos-insulacao escrotal a fim de evidenciar os defeitos de cromatina ocasionados por tal injuria termica. Apos coletadas as amostras de semen pos-insulacao, foram confeccionadas lâminas de microscopia para a avaliacao de cromatina em AT, e preparadas amostras para a avaliacao por SCSA. Verificou-se que a descompactacao cromatinica identificada pela avaliacao computacional de esfregacos de semen corados com AT quase nao detecta mudancas ao longo do tempo de insulacao, nao demonstrando piora e nem melhora na qualidade do semen com o decorrer do tempo. Ja ao SCSA, demonstra um pico de celulas danificadas, por volta dos dias 14 aos 35 de insulacao, mostrando que existe um periodo critico no qual ha maior numero de espermatozoides danificados. Com base nos resultados obtidos, pode-se concluir que o SCSA e o metodo mais indicado para identificacao da descompactacao da cromatina, devido a maior eficacia de resultados e a um maior numero de espermatozoides avaliados.