Desarrollo de pruebas serológicas y de amplificación molecular proviral para el estudio en pacientes con tuberculosis y con serología indeterminada al HTLV

En el Peru existen regiones geograficas endemicas al virus linfotropico humano de celulas T (HTLV), perteneciente a la familia Retroviridae, subfamilia Orthoretrovirinae genero Deltaretrovirus. Las investigaciones realizadas sobre coinfeccion de virus asociado a pacientes con tuberculosis (TB) y con serologia indeterminada son limitadas. En el presente trabajo, se efectuo el estudio de 14 casos con perfil serologico indeterminado al HTLV, de un total de 151 pacientes con diagnostico de tuberculosis y en tratamiento ambulatorio. Se realizaron pruebas preliminares de tamizaje Elisa y Western Blot para desarrollar los protocolos de amplificacion molecular de Nested-PCR para HTLV, a partir de celulas mononucleares de sangre periferica. Para evidenciar la presencia de los dos tipos de HTLV, fueron usadas endonucleasas como enzimas de restriccion, que hidrolizan el DNA en secuencias especificas de los segmentos del genoma proviral. Se confirmo 2/14 (14.2 %) casos positivos a HTLV considerando el protocolo de prototipo eficaz para la deteccion de virus linfotropicos en coinfectados con tuberculosis y la tecnica favorecio la deteccion de los virus HTLV-1 y HTLV-2, en esta poblacion coinfectada. En el estudio se demostro con el protocolo de amplificacion proviral la presencia de HTLV en coinfectados con tuberculosis y con pruebas complementarias de endonucleasas de restriccion. Por diferencias en sus migraciones electroforeticas se evidencio la presencia de HTLV-1 y HTLV-2 que esta circulando en pacientes ambulatorios en tratamiento de tuberculosis, tornandose una fuente de riesgo de dispersion del virus. El establecimiento de metodos de laboratorio optimizados previene la dispersion del virus en el Peru por ser endemico a ambos agentes patogenos. Resaltamos, por tanto, la gran importancia del seguimiento clinico de estos pacientes, faltando estudios de seroconversion. Los resultados nos permiten sugerir e implementar esta tecnica de diagnostico molecular en los centros de salud, esencialmente cuando los perfiles de diagnosticos serologicos son dudosos, no usar la tecnica como prueba de tamizaje. El establecimiento de la tecnica en los laboratorios va a contribuir significativamente para la definicion del estatus de infeccion retroviral de esos individuos para un aconsejamiento clinico oportuno al paciente. Continuar con los estudios de padronizar y caracterizacion molecular por la existencia de subtipos virales.