瘦素对 HepG2细胞中 BSEP 蛋白表达及信号通路的影响
2015
目的:探讨瘦素(leptin)对人肝癌细胞(HepG2)胆盐输出泵(bile salt export pump, BSEP)蛋白表达及信号通路的影响。方法:体外培养HepG2细胞,不同瘦素浓度(10-8、10-7和10-6 mol/L)作为刺激因子,分别培养24 h、48 h 和72 h后用 Western blotting法检测HepG2细胞的AMPKa、BSEP蛋白表达及 AMPKa 磷酸化( p-AMPKa)水平;筛选BSEP蛋白表达的最佳培养时间及瘦素浓度点,加入10μmol/L AMPK阻断剂compound C进行细胞培养,用Western blotting法检测BSEP蛋白表达。结果:(1)不同浓度瘦素干预HepG2细胞72 h时,随瘦素浓度增高AMPKa蛋白表达量逐渐增高,在瘦素浓度为10-6 mol/L时AMPKa蛋白表达最强(P<0.01);(2)不同浓度瘦素干预HepG2细胞24 h后,AMPKa磷酸化水平与瘦素浓度呈剂量依赖逐渐增强( P<0.01),相同瘦素浓度组AMPKa磷酸化水平随时间逐渐增加(P<0.01);(3)不同浓度瘦素干预HepG2细胞24 h后,BSEP蛋白表达水平与瘦素浓度呈剂量依赖逐渐增强(P<0.01),相同瘦素浓度组BSEP蛋白表达量随时间逐渐增加(P<0.01);(4)72 h测得10-6 mol/L瘦素组和10-6 mol/L瘦素+10μmol/L compound C组BSEP蛋白表达较正常对照组均增加( P<0.01),compound C可降低BSEP蛋白的表达(P<0.01)。结论:瘦素可通过“leptin-AMPK-BSEP”途径促进HepG2细胞BSEP蛋白表达;瘦素可促进HepG2细胞AMPKa蛋白表达及AMPKa磷酸化水平。
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