瘦素对 HepG2细胞中 BSEP 蛋白表达及信号通路的影响

目的：探讨瘦素（leptin）对人肝癌细胞（HepG2）胆盐输出泵（bile salt export pump， BSEP）蛋白表达及信号通路的影响。方法：体外培养HepG2细胞，不同瘦素浓度（10－8、10－7和10－6 mol／L）作为刺激因子，分别培养24 h、48 h 和72 h后用 Western blotting法检测HepG2细胞的AMPKa、BSEP蛋白表达及 AMPKa 磷酸化（ p-AMPKa）水平；筛选BSEP蛋白表达的最佳培养时间及瘦素浓度点，加入10μmol／L AMPK阻断剂compound C进行细胞培养，用Western blotting法检测BSEP蛋白表达。结果：（1）不同浓度瘦素干预HepG2细胞72 h时，随瘦素浓度增高AMPKa蛋白表达量逐渐增高，在瘦素浓度为10－6 mol／L时AMPKa蛋白表达最强（P＜0.01）；（2）不同浓度瘦素干预HepG2细胞24 h后，AMPKa磷酸化水平与瘦素浓度呈剂量依赖逐渐增强（ P＜0.01），相同瘦素浓度组AMPKa磷酸化水平随时间逐渐增加（P＜0.01）；（3）不同浓度瘦素干预HepG2细胞24 h后，BSEP蛋白表达水平与瘦素浓度呈剂量依赖逐渐增强（P＜0.01），相同瘦素浓度组BSEP蛋白表达量随时间逐渐增加（P＜0.01）；（4）72 h测得10－6 mol／L瘦素组和10－6 mol／L瘦素＋10μmol／L compound C组BSEP蛋白表达较正常对照组均增加（ P＜0.01），compound C可降低BSEP蛋白的表达（P＜0.01）。结论：瘦素可通过“leptin-AMPK-BSEP”途径促进HepG2细胞BSEP蛋白表达；瘦素可促进HepG2细胞AMPKa蛋白表达及AMPKa磷酸化水平。