酶解反应-柱前衍生-高效液相色谱法测定高淀粉类食品中的牛磺酸

2013 
5.000g高淀粉类食品中加入不少于1mg的高温a-淀粉酶(37.2U·mg-1)于60℃酶解反应20min,所得酶解产物经丹磺酰氯在50。C下进行衍生化,所得牛磺酸的衍生物用高效液相色谱法分析。选用DiamonsilC18色谱柱(250minx4.6mm,5μm)为固定相,以pH7.2乙酸盐缓冲溶液与乙腈按体积比75比25混合所得溶液为流动相进行淋洗,于波长247nm处进行检测。牛磺酸的色谱峰面积与其质量浓度在90mg·L-1以内呈线性关系,检出限(3S/N)为0.3mg·kg-1在4个浓度水平下做加标回收试验,酶解反应后衍生所得回收率在95.39/6~101%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.1%~1.5%之间。
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