过氧化氢处理的脐静脉血管内皮细胞miR-125b-5p水平降低但Smad4表达增加

目的探讨miR-155、miR-125b-5p、miR-210及其靶基因蛋白在氧化应激血管内皮细胞中的表达和作用。方法分离人脐静脉内皮细胞（HUVEC）并通过免疫荧光染色法检测内皮细胞Ⅷ因子相关抗原、流式细胞术检测CD31的表达进行鉴定；将分离的HUVEC进行原代培养，采用子痫前期患者血清和H2O2建立氧化应激的血管内皮细胞的模型，实验分为正常妊娠血清组、子痫前期血清组、0μmol／LH202组、100μmol／LH202组；实时定量PCR检测造模后24h细胞内miR-155、miR-125b-5p、miR-210的水平；Westernbla法检测细胞内miR-125b-5p靶基因Smad4蛋白的水平；免疫荧光染色法检测细胞内Smad4蛋白的表达；异硫氰酸荧光素标记的膜联素V／碘化丙啶（annexinV—FITC／PI）双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果与0μmol／LH2O2组相比，100μmol／LH2O2处理的内皮细胞miR-125b-5p显著降低、Smad4蛋白显著增加、细胞凋亡率和坏死率显著增加。与正常孕妇血清组相比，子痫前期血清处理的内皮细胞凋亡率和坏死率显著增加，但miR-125b-5p及Smad4蛋白变化不明显。结论H202处理的HUVECmiR-125b-5p降低，Smad4蛋白增加。