Développement d’une méthode d’imagerie multiplexée de la peau : application aux lésions cutanées contemporaines de la COVID-19

Introduction L’histologie standard et l’immunohistochimie sont les outils classiquement utilises dans le diagnostic des dermatoses inflammatoires mais ne permettent pas une etude exhaustive du tissu. D’autres methodes, telles que le sequencage d’ARN en cellule unique, fournissent des donnees quantitatives, mais necessitent une dissociation tissulaire complete a l’origine d’une perte de l’information cruciale concernant l’organisation tissulaire. Materiel et methodes Nous avons mis au point une technique d’imagerie analytique capable d’exploiter de multiples donnees de fluorescence, appelee « Unbiased cLustering of specTRal emissiON » (ULTRON). Elle permet de capturer de nombreux parametres cellulaires, tout en preservant leur localisation spatiale a partir de coupes de peau. ULTRON permet d’acquerir jusqu’a 12 marqueurs simultanement au moyen d’un microscope confocal conventionnel. Dans un second temps, les donnees acquises sont traitees par des techniques poussees de modelisation informatique associees a du « machine-learning » et analysees de maniere quantitative. Cette approche permet une identification automatique des sous-populations immunitaires et la conception d’une carte numerique du tissu, chaque sous-population etant associee a ses coordonnees spatiales precises sur l’image d’origine. Elle permet ainsi l’analyse exhaustive de la distribution, du phenotype, de la localisation des cellules immunitaires et de leur rapport entre elles et avec les elements structuraux (resolution : 200 nm). Trois panels d’anticorps specifiques ont ete valides. Resultats Le contexte sanitaire nous a conduit a observer avec interet l’apparition de cas de pseudo-engelures (et autres dermatoses) secondaires a l’infection par le SARS-CoV-2, chez des patients le plus souvent jeunes et tres peu symptomatiques sur le plan respiratoire. Nous avons mene une etude multicentrique des biopsies cutanees realisees en routine chez des patients ayant presente des pseudo-engelures (n = 15). Des patients controles, atteints de lupus engelures (n = 5) ont egalement ete etudies. La technologie ULTRON a permis d’etablir une signature immunitaire dans cette pathologie dermatologique emergente. Discussion Au-dela du developpement d’une technique d’imagerie de pointe, ces travaux ont permis la caracterisation de populations immunitaires specifiquement enrichies au cours des pseudo-engelures contemporaines de la COVID-19 et cela dans leur environnement tissulaire preserve.