二氮嗪、环孢菌素A拮抗Aβ1-42致胆碱能神经元凋亡的研究
2009
目的研究ATP敏感性钾离子通道开放剂二氮嗪、环孢菌素A及两者协同对β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)致原代培养基底前脑胆碱能神经元凋亡的影响。方法采用2μmol/L的鹏。对原代培养大鼠胆碱能神经元进行干预,建立阿尔茨海默病(AD)细胞凋亡模型;采用500μmol/L二氮嗪(预处理1h)、20μmol/L环孢菌素A以及两者协同对其干预,作用不同时间(24、72h)后置于倒置显微镜下观察细胞形态;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,Western blot法检测细胞内凋亡相关蛋白表达水平的变化。结果①邶142作用胆碱能神经元72h后,Bcl-2表达量降低(P〈0.01),细胞色素C、Caspase-3、Cleavedcaspase-3的表达量增加(P〈0.01,P〈0.001,P〈0.01),Bax未见明显变化,Bcl-2/Bax比值降低(P〈0.01),细胞形态发生明显损伤性变化,细胞存活率明显降低(P〈0.001);②二氮嗪、环孢菌素A以及两者协同作用24h后Bcl-2的表达增加(P〈0.05,P〈0.01,P〈0.01),作用72h能明显增加Bcl-2的表达(P〈0.05,P〈0.01,P〈0.01),并提升Bc-2/Bax比率而抑制细胞色素C、Caspase-3、Cleavedcaspase-3表达量(P〈0.05,P〈0.01,P〈0.001),细胞存活率均增高(P〈0.01,P〈0.001)。结论Aβ1-42作用胆碱能神经元72h能促使细胞凋亡,二氮嗪与环孢菌素A及两者协同可以明显桔抗Aβ1-42致细胞凋亡作用。
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