multiple FISH improved

Una combinacion de moleculas de acido nucleico capaces de hibridar con una secuencia de acido nucleico diana, en donde la combinacion comprende (a) al menos una primera molecula de acido nucleico que comprende (i) una secuencia capaz de hibridar con la secuencia diana, (ii) dos secuencias complementarias capaces de formar un tallo, y (iii) un grupo luminiscente y un grupo desactivador de la fluorescencia, en donde el grupo desactivador de la fluorescencia apaga el grupo fluorescente si el acido nucleico forma una estructura de bucle en horquilla, y en donde el grupo fluorescente es capaz de emitir una senal de luminiscencia despues de la excitacion si el oligonucleotido hibrida con la secuencia diana, (b) una segunda molecula de acido nucleico, una tercera molecula de acido nucleico y opcionalmente al menos otra molecula de acido nucleico, en donde la segunda molecula de acido nucleico, la tercera molecula de acido nucleico y la al menos otra molecula de acido n ucleico opcional son oligonucleotidos auxiliares que hibridan con la secuencia diana en una secuencia situada 5' y/o 3' de la secuencia con la cual hibrida el primer acido nucleico, caracterizada por que en condiciones de hibridacion identicas y en base a las secuencias diana complementarias todas las moleculas de acido nucleico con respecto a la union a sus secuencias afines respectivas de la secuencia diana, se disenan de manera que hibridan independientemente con un ΔG en el intervalo de -15 a -25 kcal/mol y sus valores de ΔG no varian mas de 3 kcal/mol.