Intégration des modèles in vitro dans la stratégie d'évaluation de la sensibilisation cutanée

Resume : Depuis l'interdiction en 2013 des tests sur les animaux par le Reglement cosmetique n°1223/2009, differentes methodes in vitro ont ete developpees. Toutefois, selon un consensus scientifique, aucune methode ne peut couvrir a elle seule l’ensemble des evenements cles (KE) definis pour la sensibilisation cutanee.Apres un etat de l’art des methodes alternatives relatives a la sensibilisation cutanee, nous avons selectionne et compare 3 tests pour ensuite determiner la meilleure strategie a suivre. Dans le but de proposer un nouveau test integre, nous avons adresse l’ensemble des KEs au sein d’un meme type cellulaire. La cellule dendritique (DC) jouant un role cle dans le developpement de la dermatite de contact allergique (DCA), notre choix s’est porte sur la lignee humaine pro-monocytaire THP-1. Nous avons etudie comme evenements initiaux (KE1) les formes reactives a l’oxygene (FRO) et le glutathion (GSH), la voie Nrf2-Keap1 (voie centrale de detoxication) et l’expression genique pour le KE2, ainsi que les modifications phenotypiques pour le KE3.Nous avons montre que les allergisants forts induisent une production precoce des FRO associee a une reduction du GSH. Ils activent egalement la voie Nrf2-Keap1 et induisent l’expression des marqueurs de surface cellulaire CD54 et CD86, ainsi qu’une production de cytokines specifiques (IL-8, IL-18,...).Pour conclure, ce travail a permis de proposer un test integrant l’ensemble des mesures biologiques comme differents KE au sein d’un meme type cellulaire.