Method for identifying allosteric effectors of a receptor.

Procedimiento de deteccion de un efector alosterico de un receptor, mediante determinacion de la variacion: - de la cinetica de disociacion y/o de asociacion del complejo formado entre dicho receptor y uno de sus ligandos en presencia de dicho efector alosterico, con respecto a la cinetica de disociacion y/o de asociacion del complejo formado entre dicho receptor y dicho ligando, en ausencia de dicho efector, - y/o de la amplitud de la union formada entre dicho receptor y uno de sus ligandos en presencia de dicho efector alosterico, con respecto a la amplitud de la union formada entre dicho receptor y dicho ligando, en ausencia de dicho efector, con la condicion de que cuando la variacion de dicha amplitud es negativa, se detecta igualmente la existencia de la variacion de dicha cinetica, estando dicho receptor y dicho ligando implicados en por lo menos una respuesta biologica en condiciones fisiologicas apropiadas, y siendo el efector alosterico capaz de modular p or lo menos una de las respuestas, siendo dicho receptor marcado mediante una proteina fluorescente seleccionada de entre las proteinas fluorescentes que proceden o derivan de proteinas autofluorescentes de nematocistos, cuyo coeficiente de extincion molecular es superior a aproximadamente 14000M-1.cm-1, y el rendimiento cuantico de fluorescencia es superior a aproximadamente 0, 38, estando el ligando marcado mediante un marcador constituido: - o bien por una molecula susceptible de absorber la luz emitida por la proteina fluorescente, - o bien por una sustancia fluorescente, llevandose a cabo dichas determinaciones de la variacion de la cinetica de disociacion y/o de asociacion y de la variacion de la amplitud, mediante transferencia de energia de fluorescencia: * entra la proteina fluorescente mencionada anteriormente y dicha sustancia fluorescente, siendo la sustancia fluorescente de tal manera que, o bien es excitable a la longitud de onda de emision de la proteina fluorescente mencionada anteriormente, o bien emite a la longitud de estimulacion de la proteina fluorescente mencionada anteriormente, o * entre la proteina fluorescente mencionada anteriormente y dicha molecula susceptible de absorber la luz emitida por la proteina fluorescente.