Méthodes et kits de détection d'interactions protéine-protéine
2016
La presente invention concerne des methodes et des kits de detection d'interactions proteine-proteine. La presente invention concerne plus particulierement une methode permettant de detecter la liaison entre un premier polypeptide (A) et un second polypeptide (B) dans une cellule, consistant a i) utiliser une cellule qui exprime (a) un polypeptide (GFP1-9) comprenant une sequence d'acides amines partageant au moins 90 % d'identite avec la sequence d'acides amines choisie dans le groupe constitue par SEQ ID No : 1-4, (b) une premiere proteine hybride dans laquelle le polypeptide (A) est fusionne avec un polypeptide (GFP10) presentant une sequence d'acides amines partageant au moins 90 % d'identite avec la sequence d'acides amines choisie dans le groupe constitue par SEQ ID No : 5-7, (c) une seconde proteine hybride dans laquelle le polypeptide (B) est fusionne avec un polypeptide (GFP11) presentant une sequence d'acides amines partageant au moins 90 % d'identite avec la sequence d'acides amines choisie dans le groupe constitue par SEQ ID No : 8-9, et (d) un intracorps specifique au complexe forme par l'autoassemblage du premier, du deuxieme et du troisieme polypeptide (a), b) et c) ; ii) detecter la fluorescence, etant ainsi determine, lorsque la fluorescence est detectee, que le polypeptide (A) se lie au polypeptide (B), et, lorsque la fluorescence n'est pas detectee, que les polypeptides (A) ne se lient pas au polypeptide (B).
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