Nuevas aplicaciones de sustratos indoxílicos en biosensores y en análisis clínicos

EL USO DE SUSTRATOS INDOXILICOS ESTA GENERALMENTE RELACIONADO CON LA REALIZACION DE ENSAYOS CUALITATIVOS O SEMICUANTITATIVOS SONDE UN PRODUCTO INSOLUBLE Y COLOREADO ES DEPOSITADO SOBRE UN SUSTRATO SOLIDO. EN ESTA TESIS DOCTORAL SE EMPLEAN SUSTRATOS ENZIMATICOS INDOXILICOS EN ENSAYOS CUANTITATIVOS HACIENDO USO DE TECNCIAS ELECTROQUIMICAS Y OPTICO.ESPECTROSCOPICAS. SE MUESTRAS LA POTENCIALIDAD DE UTILZIAR EL SUSTRATO 3-INDOXIL FOSFATO COMO SUSTRATO DE LA PEROXIDASA UNIDO A LA POSTERIOR CUANTIFICACION DEL AZUL DE INDIGO PREVIA SULFONACION CON ACIDO SULFURICO CONCENTRADO. LA DETERMINACION DEL DERIVADO SOLUBLE, INDIGO CARMIN, SE REALIZA POR TECNICAS VOLTAMPEROMETRICAS SOBRE ELECTRODOS SERIGRAFIADOS DE CARBONO Y SE DEMUESTRA LA POSIBLIDAD DE UTILIZAR ESTA METODOLOGIA EN INMUNOENSAYOS TIPO ELISA PARA LA DETERMINACION DE NEUMOLISINA. SE PRESENTA TAMBIEN LA POSIBILIDAD DE SOLUBILIZAR EL AZUL DE INDIGO EN PRESENCIA DE UN AGENTE REDUCTOR EN UN MEDIO BASICO, PROCEDIENDO A CUANTIFICAR FINALEMNTE EL LEUCOINDIGO GENERADO POR TECNICAS ELECTROQUIMICAS SOBRE ELECTRODOS DE PASTA DE CARBONO O HACIENDO USO DE TECNICAS COMO LA FLUORESCENCIA MOLECULAR O LA ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION MOLECULAR. SE PLANTEA TAMBIEN EL USO DE SUSTRATOS INDOXILICOS EN COMBINACION DE IONES PLATA COMO UN NUEVO SUSTRATO DE LA FOSFATASA ALCALINA. A TRAVES DE ESTA REACCION SE GENERA UN COPRECIPITADO DE PLATA METALICA Y DE AZUL DE INDIGO, AUNQUE LA MEDIDA DE LA PLATA METALICA POR REDISOLUCION ANODICA PERMITE LA REALIZACION DE GENOSENSORES ELECTROQUIMICOS DE ALTA SENSIBILIDAD.