OTIMIZAÇÃO DE PROTOCOLOS DE EXTRAÇÃO DE RNA EM DIFERENTES TECIDOS DE MILHO

Neste trabalho, foram testados cinco metodos de extracao de RNA (CTAB microextracao (Chang et al., 1993), Concert™ Invitrogen, Concert™ Adaptado, TRI Reagente® Sigma e TRI Reagente® Adaptado), em dois diferentes tecidos de milho (mesocotilo e raiz), com o objetivo de estabelecer um metodo eficiente de extracao de RNA, visando posteriormente estudos de expressao genica. Observou-se que o metodo Concert ,utilizando o protocolo adaptado, foi o mais eficiente para a extracao de RNA de ambos os tecidos de plântulas de milho, originando 2351,35 µg por 100 mg de tecido para mesocotilo e 893,75 µg por 100 mg de tecido para raiz, considerando tanto a quantidade como a qualidade das amostras, podendo ser submetidas as etapas posteriores de tratamento com DNAse e construcao de cDNA para estudos de expressao genica. Pode-se observar que pequenas modificacoes nos protocolos, como, por exemplo, mudanca no tempo e na posicao dos tubos durante a incubacao e o incremento de duas lavagens com cloroformio, podem melhorar muito tanto a qualidade quanto a quantidade do RNA extraido.