ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ФАКТОРОВ ЭКСЦИЗИОННОЙ РЕПАРАЦИИ НУКЛЕОТИДОВ XPC-HR23B, XPA И RPA С ПОВРЕЖДЕННОЙ ДНК

Исследовано взаимодействие белков, участвующих в процессе эксцизионной репарации нуклеотидов - фактора Xeroderma pigmentosum комплементационной группы С в комплексе с гомологом дрожжевого белка Rad23 (XPC-HR23B), репликативного белка А (RPA) и фактора Xeroderma pigmentosum комплементационной группы А (XPA) - с 48-мерными ДНК-дуплексами, моделирующими поврежденную ДНК. Показано, что все исследуемые белки демонстрируют незначительное предпочтение в связывании поврежденной ДНК по сравнению с нативным ДНК-дуплексом. RPA стимулирует образование комплексов XPC-HR23B с ДНК, при совместном присутствии ХРА и XPC-HR23B в реакционной смеси наблюдается синергизм во взаимодействии этих белков с ДНК. RPA образует ковалентные сшивки с ДНК, содержащими фотореакционноспособный остаток 5I-dUMP в одной цепи и повреждение в виде флуоресцеин-замещенного производного dUMP в противоположной цепи дуплекса, а также стимулирует образование ковалентных сшивок XPC-HR23B с ДНК. Следовательно, RPA может являться одним из основных регуляторов процесса эксцизионной репарации нуклеотидов на различных его этапах. Полученные данные свидетельствуют в пользу модели кооперативного связывания белков, участвующих в формировании предрасщепляющего комплекса, с ДНК-дуплексами, несущими повреждения.