干扰NaV1.9对RAW264.7细胞增殖、吞噬和迁移的影响

目的应用RNA干扰技术沉默RAW264.7小鼠巨噬细胞中电压门控性钠通道（VGSCs/NaVs）α亚单位NaV1.9基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能的影响。方法通过Lipofectamine^TM2000将短发夹RNA（shRNA）干扰质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选获得稳定细胞株。用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）鉴定干扰效率,CCK-8法测定稳定细胞株的增殖活性,流式细胞术检测细胞的细胞周期及吞噬能力,Transwell小室法检测细胞的迁移功能。结果成功建立稳定干扰NaV1.9的细胞株,RT-PCR法鉴定干扰效率达80%。CCK-8法及流式细胞术结果显示,降低NaV1.9的表达使细胞增殖活性下降（P〈0.05）;流式细胞术结果显示,抑制NaV1.9的表达使细胞吞噬能力降低（P〈0.05）;Transwell小室法结果显示,干扰NaV1.9的表达使细胞迁移能力减弱（P〈0.05）。结论建立了稳定干扰NaV1.9的RAW264.7细胞株,下调NaV1.9的表达使巨噬细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能显著降低。