Diagnóstico de los carcinomas orofaríngeos relacionados con el virus del papiloma humano (VPH) : detección viral mediante técnicas comerciales de uso clínico y análisis de su valor pronóstico

espanolLos carcinomas de cabeza y cuello son el sexto tipo mas frecuente de cancer a nivel global. En los ultimo anos se ha puesto de manifiesto un incremento en la incidencia de los carcinomas orofaringeos atribuida a la oncogenesis asociada al virus del papiloma humano (VPH), que muestran caracteristicas clinicas, morfologicas y pronosticas diferenciales respecto a los tradicionalmente atribuidos al consumo de alcohol y tabaco. Estos carcinomas serian susceptibles de ser tratados con terapias individualizadas que supongan una mejora en la calidad de vida del paciente respecto a la alcanzada con el manejo clinico que se realiza en la actualidad. Sin embargo, el diagnostico de estos tipos de cancer presenta dificultades tecnicas e interpretativas, y aun no se ha establecido el procedimiento mas adecuado para el diagnostico de este tipo de carcinomas. En nuestro estudio, realizamos un analisis comparativo de distintas tecnicas comerciales de uso clinico en muestras de tejido embebido en parafina de carcinomas orofaringeos diagnosticados en el Hospital Clinico Universitario Virgen de la Arrixaca (HCUVA) (Murcia) entre 2005 y 2016, y evaluamos su valor pronostico en la deteccion de carcinomas orofaringeos relacionados con VPH. En este trabajo consideramos los distintos enfoques diagnosticos posibles, comparando los resultados obtenidos mediante cinco tecnicas de deteccion de ADN de VPH con diferentes dianas biologicas y fundamentos moleculares [HPV Xpert® (Cepheid), Anyplex® II HPV28 Detection (Seegene), CLART® HPV4 (Genomica), INNO-LiPA® HPV Genotyping Extra II (Fujirebio), AmpFire® (Atila Biosystems)], dos tecnicas de deteccion de ARNm viral de las proteinas E6/E7 (PreTect® HPV-Proofer (NorChip) y QuantiVirus® HPV E6/E7 RNA (DiaCarta)] y la deteccion de la sobreexpresion de p16 mediante tincion inmunohistoquimica. Nuestro estudio revela que las tecnicas evaluadas obtienen resultados concordantes en mayor o menor grado para la deteccion de VPH, y que podrian ser de utilidad en el diagnostico de carcinomas orofaringeos relacionados con VPH. Ademas, se observa que las tecnicas de deteccion de ADN viral son las que proporcionan un mayor valor pronostico para este tipo de carcinomas y que la ausencia de sobreexpresion de la proteina p16 se asocia a la negatividad para la deteccion de VPH. Estos resultados sugieren que se podria realizar un adecuado diagnostico de los carcinomas orofaringeos relacionados con VPH mediante un algoritmo en dos pasos en el que se realice, en primer lugar, la deteccion de la sobreexpresion de la proteina p16, y en caso de ser esta positiva, la deteccion de ADN de VPH. EnglishHead and neck carcinomas are the sixth most common cancer worldwide. Although these types of cancer are typically associated to alcohol and tobacco exposure, there is an increasing incidence of oropharyngeal cancers attributed to human papillomavirus (HPV) related oncogenesis. HPV-related oropharyngeal carcinomas (OPC) show pathological, clinical, and prognostic differential characteristics, and could benefit from new treatment strategies able to reduce treatment-related toxicity and improve the quality of life and survival of the patients. However, HPV testing for the diagnosis of HPV-associated OPC is still challenging, and at the moment, it has not been established the test or testing algorithms to reliably perform the laboratory diagnosis of this type of carcinomas. In our study, we performed a comparative evaluation of commercial HPV-testing assays in formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) samples from oropharyngeal carcinomas diagnosed at Hospital Clinico Universitario Virgen de la Arrixaca (HCUVA) (Murcia, Spain) between 2005-2016, and analyzed their prognostic value. Several diagnostic approaches were considered, comprising five DNA-HPV detection assays covering different biological and molecular targets [HPV Xpert® (Cepheid), Anyplex® II HPV28 Detection (Seegene), CLART® HPV4 (Genomica), INNO-LiPA® HPV Genotyping Extra II (Fujirebio) and AmpFire® (Atila Biosystems)], two viral mRNA E6/E7 detection assays [PreTect® HPV-Proofer (NorChip) and QuantiVirus® HPV E6/E7 RNA (DiaCarta)] and the immunohistochemical detection of p16 overexpression. Our study reveals that the evaluated assays obtain, to different extents, concordant results for HPV-detection, and support their suitability for their use on the diagnosis of HPV-related OPC. Among them, the HPV-DNA detection assays provide a better prognostic value for this type of carcinomas, while the absence of p16 overexpression is associated with the negativity of the HPV-detection assays. These results suggest the suitability of a two-step algorithm for the reliable laboratory diagnosis of HPV-related OPC, consisting on the detection of p16 overexpression followed by HPV-DNA detection.