青海藏区 B 型沙眼衣原体的分离培养与鉴定

目的对青海藏区沙眼患者标本进行沙眼衣原体分离培养与鉴定。 方法分别采集患者的单眼结膜和结膜囊拭子标本至1 mL样本保护培养基中。取50µL样本采用离心法感染BGM细胞，37培养72 h，连续传代3次，相差显微镜观察衣原体包涵体。对临床样本和分离株分别进行主要外膜蛋白基因 ompA 序列分析。 结果共采集了45例活动性沙眼患者的115份临床样本，其中54份样本为 ompA PCR阳性，15份样本为沙眼衣原体培养阳性。 ompA 分析发现，青海藏区沙眼衣原体有3个不同的同源 ompA 变异株，均为基因B型，都包含有一个泌尿生殖道型沙眼衣原体特有密码子。分离株QH111L和QH111R分别来自编号111患者的左眼和右眼样本，它们 ompA 基因的可变区有一个非同义碱基差异。该碱基变异仅存在于111号患者的左眼样本中，说明QH111L可能是新出现的 ompA 突变体。 结论青海藏区的眼型沙眼衣原体流行株为基因B型，至少存在3个不同的 ompA 变异株。从青海藏区分离培养了15株眼型沙眼衣原体，发现同一患者的左右眼样本中的沙眼衣原体有不同 ompA 。本研究为研制沙眼疫苗和诊断试剂奠定了基础，也将有助于理解沙眼的进化和传播。