miR-138-5p在锰致SH-SY5Y细胞自噬中的作用
2018
[目的] 探讨miR-138-5p在氯化锰(MnCl 2 )诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞自噬中的作用及其机制。 [方法] 以生理盐水处理组作为对照,0.125、0.25、0.5、1 mmol/L MnCl 2 染毒SH-SY5Y细胞6 h后,利用MTT法检测细胞活力;0.25和0.5 mmol/L MnCl 2 处理细胞6 h后,采用Western blot检测自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达;MnCl 2 染毒6 h后,使用反转录PCR和Western blot检测miR-138-5p和组蛋白脱乙酰酶SIRT1 mRNA以及蛋白表达的变化;使用miRNA模拟物转染细胞实现miR-138-5p过表达,然后0.25 mmol/L MnCl 2 染毒6 h,检测SIRT1 mRNA和蛋白的表达以及自噬相关蛋白LC3和Beclin1的变化。 [结果] MnCl 2 可剂量依赖性地降低SH-SY5Y细胞活力(趋势 χ 2 =12.42, P 2 染毒后,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值和Beclin1表达水平明显增加( P P 2 染毒组,SIRT1 mRNA及蛋白表达均出现下调,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值及Beclin1蛋白表达也相应下调( P [结论] miR-138-5p过表达可通过调节SIRT1的表达抑制锰诱导的SH-SY5Y细胞自噬。
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