CARACTERIZACIÓN DE LA RESPUESTA INMUNE DE LAS VESÍCULAS DE MEMBRANA EXTERNA (OMVS): IMPACTO DE POBLACIONES CELULARES EFECTORAS Y ENTORNO DE ACTIVACIÓN EN LA RESPUESTA PROTECTORA CONTRA PERTUSSIS

La tos convulsa o pertussis es una enfermedad respiratoria infecto-contagiosa e inmunoprevenible que en los ultimos anos se ha detectado un aumento sostenido de casos aun en paises con altas coberturas de vacunacion.  Esta situacion ha obligado a la comunidad cientifica a reforzar los estudios para la generacion y caracterizacion de nuevas posibles formulaciones vacunales anti-pertussis. En nuestro grupo de trabajo hemos desarrollado una nueva vacuna acelular a partir de componentes de la membrana externa del agente etiologico de la enfermedad, la bacteria B. pertussis (vesiculas de membrana externa, OMVBp por sus siglas en ingles). La misma ha resultado ser tanto inmunogenica como tambien protectora y biosegura en el modelo murino de proteccion. En mi plan de investigacion nos proponemos profundizar el conocimiento sobre los efectores y los mecanismos de la respuesta inmune protectora que desencadena el candidato vacunal. En particular la identificacion y caracterizacion de poblaciones celulares de importancia en el contexto de la inmunizacion contra pertussis como asi tambien la evaluacion de vias innatas y mecanismos de senalizacion en macrofagos murinos y humanos en respuesta a OMV. Los objetivos de este plan pueden resumirse en: Generacion y puesta a punto de herramientas necesarias para la identificacion y caracterizacion de efectores en el contexto de la inmunizacion contra pertussis utilizando el modelo murino de proteccion. 1.1 Generacion de herramientas que permitan identificar los componentes relevantes en la induccion de la respuesta humoral de nuestro candidato vacunal.   1.1.1 Optimizacion de condiciones experimentales para el mantenimiento de hibridomas productores de anticuerpos de potencial importancia en la proteccion. 1.1.2 Generacion de anticuerpos monoclonales anti OMVs. 1.2 Optimizacion de estrategias experimentales para poner de relevancia el rol de celulas efectoras en la proteccion anti pertussis en el modelo murino. 1.3 Optimizacion de condiciones experimentales in vitro para la evaluacion de vias y mecanismos de senalizacion celulares en respuesta a OMVs. Caracterizacion de la respuesta inmune desencadenada por la vacunacion por OMVs 2.1 Analisis del perfil humoral generado por las distintas formulaciones vacunales anti pertussis (wP, aP y OMVBp) 2.2 Relevancia de poblaciones celulares especificas en la proteccion anti pertussis: 2.2.1 Impacto de la deplecion de las poblaciones linfocitarias TCD4, TCD8, B220 y T γδ frente al desafio intranasal con Bordetella pertussis en el modelo murino de proteccion. 2.2.2 Impacto del enriquecimiento de las poblaciones linfocitarias TCD4, TCD8 y B220 frente al desafio intranasal con Bordetella pertussis en el modelo murino de proteccion 2.2.3 Impacto de las poblaciones linfocitarias de memoria tejido-especifica en el modelo de proteccion murino: esplenectomia y desafio en animales inmunizados.