El descenso del número de linfocitos B de memoria en pacientes con inmunodeficiencia variable común está asociado a una apoptosis aumentada de esta población celular. Desarrollo de un método nuevo para la detección de la apoptosis en muestras de sangre completa

Resumen La inmunodeficiencia variable comun (IDVC) es una enfermedad heterogenea caracterizada por una disminucion de los valores absolutos de los linfocitos B de memoria en la sangre periferica. A pesar de que esta disminucion se ha atribuido previamente a un posible defecto en el desarrollo del centro germinal, las causas permanecen en gran medida desconocidas. Por otro lado, la apoptosis aumentada de los linfocitos B ha sido implicada en la patogenesis de diversas enfermedades. Hasta ahora, sin embargo, no se ha descrito un balance negativo entre apoptosis/supervivencia de los linfocitos B de memoria en los pacientes con IDVC y por ello nos preguntamos si una apoptosis aumentada podria ser relevante en la IDVC. En este estudio determinamos la apoptosis espontanea e inducida de los linfocitos B de memoria de pacientes con IDVC y controles sanos mediante citometria de flujo. La apoptosis se cuantifico mediante la expresion de la anexina v tras un cultivo de 24 h en presencia o ausencia de un anticuerpo monoclonal proapoptotico anti-CD95. Ademas, desarrollamos un metodo nuevo y sensible que utiliza 7-amino-actinomicina D (7-AAD) para detectar linfocitos B apoptoticos en sangre completa. Nuestros resultados indican claramente una disminucion del valor absoluto de linfocitos B de memoria y una apoptosis incrementada en los pacientes con IDVC con respecto a los controles sanos (p