Análise da expressão de fatores de transcrição característicos de TH1, TH2, TH17 e TREG em células TCD4+ de crianças asmáticas

Introducao: A asma e uma doenca prevalente em criancas, tendo como principal caracteristica a inflamacao e hiperresponsividade das vias aereas. Alem das celulas Th2, as celulas Th17, Th1 e Treg sao envolvidas na patologia da doenca pela funcao que elas e as citocinas por elas secretadas exercem. A asma apresenta dois fenotipos principais, os quais dependem da presenca de atopia. As celulas TCD4 apresentam plasticidade, que sao influenciadas por fatores ambientais e geneticos. Objetivos: Avaliar o perfil fenotipico de celulas TCD4 de criancas em idade escolar asmaticas, com ou sem a presenca de atopia e de controles saudaveis. Correlacionar os dados obtidos com a severidade da doenca. Alem disso, avaliar as celulas que co-expressam mais de um fator de transcricao no sangue de criancas asmaticas atopicas para D.pteronyssinus estimulando as celulas com a proteina Derp1. Materiais e metodos: Este foi um estudo transversal caso-controle, onde criancas de 8 a 14 anos foram recrutadas de escolas publicas de Porto Alegre/RS, asmaticas e controles. As celulas mononucleares foram isoladas por Histopaque do sangue periferico destas criancas e colocadas em cultura com anti-CD3/CD28 ou com proteina Derp1. Apos 24hs as celulas foram marcadas com anticorpos especificos para os fatores de transcricao para analise do perfil Th2, Th17, Th1 e Treg por citometria de fluxo. Alem disto, foi analisado no plasma a IgE especifica para um painel de alergenos. Resultados: Os resultados obtidos mostraram que as comparado com os controles. As celulas duplo-positivas CD4+GATA-3+RORγt+ correlacionaram com o grau de severidade da doenca, exceto com asma severa de dificil controle (ADC). Pacientes atopicos apresentaram uma proporcao maior de celulas co-expressando mais de um fator de transcricao comparados com individuos nao-atopicos. Estimulacao de celulas provenientes de pacientes atopicos com a proteina Derp1 aumenta a frequencia de celulas CD4+Foxp3+RORγt+ quando comparados com o controle e estimulacao com anticorpos anti-CD3 e anti-CD28. Conclusao: De uma maneira geral, os resultados apresentados nesta tese nos permitem concluir que os alergenos desempenham um papel importante no desenvolvimento das celulas que expressam mais de um fator de transcricao em pacientes atopicos. Alem disso, nosso estudo foi o primeiro a demonstrar que criancas com ADC apresentam um perfil distinto de expressao de fatores de transcricao reguladores de celulas TCD4 do tipo Th1, Th2, Th17 e Treg quando comparado com criancas com doenca menos severa.