survivin-si RNA质粒的构建及其抑制survivin基因在Hela细胞中的表达

目的合成、克隆、筛选survivin-si RNA干扰片段,构建含有survivin-si RNA的骨架质粒,明确其抑制survivin基因在Hela细胞中表达。方法利用RNA干扰方法构建真核表达载体pGenesil1.1-survivin-si RNA。体外培养人宫颈癌Hela细胞,利用脂质体法将该质粒转染Hela细胞。利用Western blot法检测该质粒转染后survivin基因的表达,筛选最佳干扰质粒。通过MTT法检测Hela细胞的生长。通过流式细胞学技术检测细胞凋亡率。结果成功构建及筛选出survivin-si RNA质粒。MTT实验及流式细胞学实验证实该质粒体外能够有效诱导细胞凋亡。结论成功构建survivin-si RNA质粒,为今后应用该质粒进行宫颈癌的基因治疗提供了实验基础。