黄瓜单链DNA结合蛋白基因 CsWHY1 的克隆及表达分析

目的单链DNA结合蛋白Whirly（WHY）是植物体内广泛存在的一类转录因子，在植物叶片衰老等方面具有重要作用。本文旨在克隆黄瓜单链DNA结合蛋白基因 CsWHY1 ，初步分析其表达特征，为黄瓜叶片衰老的功能研究提供参考。 方法以华北型黄瓜‘9930’‘长春密刺’和‘新泰密刺’为试验材料，克隆 CsWHY1 的cDNA全长，应用生物信息学方法对该基因进行生物信息学分析，并利用洋葱表皮细胞瞬时表达系统对CsWHY1蛋白进行亚细胞定位，同时通过RT-qPCR技术分析 CsWHY1 基因在3个黄瓜品种不同组织中的表达模式。 结果 CsWHY1 基因包含1个长度为831 bp的开放阅读框（ORF），共编码276个氨基酸，蛋白理论相对分子质量为30.729×10 3 ，理论等电点（pI）为9.00，属于亲水蛋白。氨基酸序列分析表明，CsWHY1蛋白具有保守的Whirly结构域，在双子叶植物和单子叶植物中高度同源，且与甜瓜亲缘关系最近。亚细胞定位发现CsWHY1蛋白在洋葱表皮的质体上表达。荧光定量PCR分析其表达模式，发现 CsWHY1 在不同黄瓜品种不同组织中均有表达，叶片中表达量最高，根和茎中表达量较低，其中衰老叶片中的表达量显著高于成熟叶片。 结论 CsWHY1 基因的表达具有组织特异性，在衰老叶片高表达，参与了黄瓜叶片衰老进程。