Desarrollo y validación de un método para la determinación de darunavir en plasma mediante LC-MS/MS

Resumen Introduccion Darunavir es uno de los farmacos inhibidores de la proteasa de ultima generacion utilizado para el tratamiento de la inmunodeficiencia adquirida por VIH debido a su destacada eficacia terapeutica y su mejor tolerancia, entre otras peculiaridades. Varios estudios demuestran una correlacion entre la dosis y el efecto de darunavir, aunque todavia no se ha establecido un intervalo terapeutico para las concentraciones del farmaco. Estos factores junto con una elevada variabilidad farmacocinetica interindividual ademas de interacciones farmacologicas con otros farmacos, refuerzan la idea de la importancia de disponer de un metodo sensible para la monitorizacion de sus concentraciones plasmaticas en pacientes tratados. Objetivos Validacion tecnica de un metodo para la determinacion de las concentraciones plasmaticas de darunavir mediante LC/MS/MS. Materiales y metodos El proceso de validacion se desarrollo segun el procedimiento descrito en la guia ICH Topic Q 2B Validation of Analytical Procedures: Methodology ( CPMP/ICH/281/95 ). El darunavir se extrae del plasma mediante una precipitacion de proteinas. La separacion cromatografica se consiguio utilizando una columna X-Bridge TM C18 3,5 μm 2,1 × 100 mm (Waters ® ) con un programa de elucion en gradiente de acetonitrilo y tampon. Para la deteccion de los analitos, se utilizo un espectrometro de masas de triple cuadrupolo Quattro micro con electroespray en modo de ionizacion positivo. Resultados Linealidad (0,1-10 μg/mL): y = 18,85×-150,4 r 2 : 0,997. Precision: CV intraensayo: 1,07-4,62%. CV interensayo: 2,72-4,70%. Exactitud: intra-ensayo: 1-9%; inter-ensayo: 2-7%; LD: 0,05 μg/mL; LQ: 0,15 μg/mL. Conclusiones Este metodo desarrollado basado en LC/MS/MS, posee una adecuada sensibilidad y reproducibilidad para la determinacion de darunavir en plasma de pacientes tratados.