半滑舌鳎 ( Cynoglossus semilaevis ) c - Jun 基因的克隆及免疫应答分析

半滑舌鳎 ( Cynoglossus semilaevis ) AP-1家族转录因子 c - Jun 基因 (Jun proto-oncogene) 及其在免疫应答中的作用尚无报道。本研究根据半滑舌鳎转录组数据库中预测的 c - Jun 序列，通过RACE技术和PCR扩增方法获得了半滑舌鳎 c - Jun 基因cDNA全长2093 bp，CDS区域共981 bp，编码326个氨基酸，5 UTR区域377 bp，3 UTR区域735 bp。SMART分析显示，C-JUN蛋白具有2个结构域：AP-1家族典型结构域Jun，以及高度保守的亮氨酸拉链结构域 (BRLZ)。经蛋白多序列同源比对、系统进化树分析，发现半滑舌鳎 c - Jun 与虹鳟 ( Oncorhynchus mykiss ) c - Jun 亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析显示， c - Jun 基因在半滑舌鳎不同组织中普遍表达，在卵巢中表达量最高。鳗弧菌 ( Vibrio anguillarum ) 人工感染半滑舌鳎后， c - Jun 基因在肝脏、脾脏、头肾、小肠、鳃、血液中表达量都出现不同程度上调，其中，鳃中变化最明显：感染12 h后表达量达到0 h时的13.20倍。使用LPS、PGN、PolyI:C和WGP病原模拟物刺激半滑舌鳎外周血淋巴细胞，结果显示，WGP诱导 c - Jun 基因上调表达，而LPS与PolyI:C均下调基因表达。以上实验结果表明， c - Jun 基因在半滑舌鳎的免疫防御中发挥重要作用。