Eupenicillium sp.UN88胞内活性物质的鉴定及含量测定

采用液相色谱-质谱联用技术对Eupenicillium sp.UN88胞内活性物质进行定性鉴别,以高效液相色谱法测定其含量。色谱条件：色谱柱为Kromail C18（4.6mm×250mm,5μm）,以甲醇∶水（60∶40,V/V）为流动相,流速1.0mL/min,检测波长230nm,柱温30℃。采用ESI-MS总离子流跟踪分析HPLC的洗脱液,并用低能量CID-MS-MS及CID-MS-MS-MS进一步确定目标离子峰。结果表明Eupenicillium sp.UN88胞内主要产布雷菲德菌素A（BFA）。BFA在0.1—5.0mg/mL浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.9999,n=6）,平均回收率为100.6%,RSD为1.3%（n=9）,检出限为0.3μg/mL。因此,Eupenicillium sp.UN88发酵产生具有活性的胞内次级代谢产物与BFA同质;建立检测BFA的RP-HPLC快速、简便、准确可靠,为筛选BFA的高产菌和质量监测提供可靠依据。