Sampling strategies for the detection of grapevine fanleaf virus and the grapevine strain of tomato ringspot virus

This study was conducted to determine the influence of season, host genotype virus isolate and sample tissue on ELISA detection of the two nepoviruses. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) readily detects grapevine fanleaf virus (GFLV) and the causal agent of grapevine yellow vein, tomato ringspot virus (TomRSV) in infected grapevines. Three serologically identical isolates of GFLV (fanleaf deformation, vein-banding and yellow mosaic) were examined in one cultivar of Vitis rupestris SCHEELE and in three cultivars of V.. vinifera L. TomRSV was examined in V. vinifera cv. Carignane. The tissues tested included: shoot tips, mature leaves and cambial scrapings. The following tissues taken from GFLV-infected dormant canes were also tested: sawdust, cambial scrapings, dormant buds, and induced shoots, roots and callus. There were no differences in GFLV ELISA results when different cultivars and virus isolates were compared. However, seasonal differences in ELISA detection of GFLV were observed. Shoot tip values went from a high of > 4.00 OD 450nm in May to a low of 0.05 OD 450nm in September. 'Mature leaves also gave the highest values in May and rapidly decreased to relatively low and constant levels throughout the rest of the season. ELISA values from cambial scrapings were moderately high and relatively constant throughout the season. When GFLV-infected dormant canes were tested, induced actively growing tissues gave the highest ELISA values. TomRSV ELISA values were relatively constant over the season and shoot tips, mature leaves and cambial scrapings produced similar ELISA values. Strategien der Probenahme zur Feststellung des Grapevine fanleaf-Virus und des Tomato ringspot-Virus der Rebe Das Ziel der vorliegenden Untersuchung war es, den Einflus der Jahreszeit, des Wirtsgenotyps, des Virusisolates und des Pflanzengewebes auf den Nachweis zweier Nepoviren durch ELISA zu bestimmen. Das Virus der Reisigkrankheit (GFLV} und der Erreger der Adernvergilbung bei Reben, das Tomatenringfleckenvirus (TomRSV}, konnen durch Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) leicht nachgewiesen werden. Drei serologisch identische Isolate von GFLV (verantwortlich fur Facherblattrigkeit, Adernaufhellung und Panaschure) wurden an einer Sorte von Vitis rupestris SCHEELE und drei Sorten von V. vinifera L., TomRSV wurde an V. vinifera cv. Carignane getestet. Hierbei wurden Triebspitzen, ausgewachsene Blatter und Kambiumschabsel gepruft. Von dormantem GFLV-infiziertem Rebholz wurden untersucht: Sagemehl, Kambiumschabsel, Ruheknospen, sowie aus dem Holz entstandene Triebe, Wurzeln und Kallusgewebe. Die Ergebnisse des ELISA-Tests wurden weder durch die Testrebensorte noch durch das Virusisolat beeinflust. Mittels ELISA konnten jedoch jahreszeitlich bedingte Unterschiede im GFLV-Titer nachgewiesen werden. Bei den Triebspitzen sanken die Werte von einem Maximum > 4.00 OD 450nm im Mai auf ein Minimum von 0.05 OD 450nm im September. Auch ausgewachsene Blatter zeigten im Mai die hochsten Werte, die dann rasch auf ein relativ niedriges und gleichbleibendes Niveau zuruckgingen. Die ELISA-Werte des Kambiumschabsels blieben wahrend der ganzen Vegetationsperiode relativ hoch und stabil. Beim Test von GFLV-infiziertem dormantem Schnittholz zeigten die induzierten, wachsenden Gewebe die hochsten ELISA-Werte. Die ELISA-Werte fur TomRSV blieben wahrend der Vegetationsperiode relativ konstant, und es gab kaum Unterschiede zwischen Triebspitzen, ausgewachsenen Blattern und Kambiumschabsel.