Establishment of transgenic mice for HRX-EEN fusion gene

目的建立 HRX-EEN 融合基因转基因小鼠为新药的筛选提供理想的动物模型. 方法通过拼接,用3个不同来源的DNA构建成 HRX-EEN 融合基因,并将其装入hCG转基因载体中;通过显微注射将上述DNA导入受精卵雄核中,植入养育母鼠输卵管,发育获得G0代小鼠;PCR检测融合基因的整合,逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR )检测融合基因的表达. 结果测序证实拼接的 HRX-EEN 融合基因正确;PCR共检测出7个 HRX-EEN 转基因阳性的G0代小鼠,将这些小鼠与野生型的C57系小鼠交配,结果除35号死亡外,其余G0代转基因阳性小鼠均产下F1代,建成6个单系的 HRX-EEN 转基因小鼠.用RT-PCR方法检测其中5个系小鼠 HRX-EEN 融合基因的表达状况,证实该融合基因在3个单系中稳定表达.表达融合基因的转基因小鼠迄今未发现明显异常. 结论构建完成的 HRX-EEN 转基因小鼠模型能稳定表达.