大肠杆菌TdcC、SstT和LIV-1系统缺失对胞外L-苏氨酸积累的影响

目的比较分析苏氨酸吸收系统TdcC、SstT和LIV-1缺失对大肠杆菌吸收和积累胞外苏氨酸的影响。 方法从菌株 E. coli W3110出发，敲除 tdcC 、 sstT 和 livJ 基因，构建TdcC、SstT和LIV-1系统单缺失和多缺失菌株，将过量表达苏氨酸操纵子基因的重组质粒pKKthrA C1034T BC分别转入原始菌和重组菌，考察各菌株吸收和积累胞外苏氨酸的能力。 结果敲除 tdcC 和 sstT 基因的重组菌T04的苏氨酸吸收能力比原始菌W3110降低了43.28%，T04 (pKKthrA C1034T BC)胞外苏氨酸积累量最高达到1.09 g/L，比对照菌W3110(pKKthrA C1034T BC)高出172.5%。敲除 tdcC 、 sstT 和 livJ 基因的重组菌T07的苏氨酸吸收能力比T04降低了12.97%，然而T07(pKKthrA C1034T BC)胞外苏氨酸积累量最大为0.63 g/L，与T04(pKKthrA C1034T BC)相比降低了42.2%。 结论阻断TdcC和SstT系统，能有效降低大肠杆菌吸收苏氨酸的能力，提高苏氨酸的胞外积累量。阻断LIV-1系统，虽然能减少大肠杆菌对苏氨酸的吸收，却不利于菌株积累胞外苏氨酸。