人口腔癌症缺失相关蛋白（DOC-1R）的表达、纯化和晶体生长

口腔癌缺失（Deleted in Oral Cancer-1，DOC-1）基因是近年来被证实的口腔癌中具有抑癌作用的基因。1999年，研究人员通过酵母双杂交实验又发现了与DOC-1相关的另一候选抑癌基因DOC-1R（DOC-1 related）。以往的很多实验表明，这两个蛋白无论序列还是功能上都非常相似。然而，其三维结构以及与其他重要蛋白相互作用的机制一直还不清楚，PDB库中也未见其相关同源结构的报道。作者将人DOC-1R基因的eDNA片段克隆至原核表达载体pET-22b㈩中，通过IPTG诱导获得高效表达，再经过Ni-NTA亲和层析和Superdex75层析柱纯化，获得了纯度达到96％以上的蛋白。质谱分子量测定显示DOC-1R的分子量为14091．23Da，与理论分子量基本一致；动态光散射实验显示蛋白均一性高达99．0％，可用于晶体生长；采用悬滴气相扩散法筛选，在多个条件下得到了DOC-1R的微晶。为DOC-1R的三维结构解析奠定了坚实的基础。