溶藻弧菌胱硫醚- β -合成酶基因 cbs 的克隆、生物学信息分析及原核表达

提取溶藻弧菌（ Vibrio alginolyticus ）的总DNA，克隆溶藻弧菌胱硫醚- β -合成酶基因 cbs ，对其进行生物信息学分析。结果表明，所克隆溶藻弧菌 cbs 基因的开放阅读框为1 095 bp，编码364个氨基酸。氨基酸序列比对发现，溶藻弧菌的CBS蛋白与其他弧菌的CBS相似性极高，与副溶血弧菌（ V. parahaemolyticus ）CBS氨基酸序列相似性达98%；CBS蛋白质的二级结构为典型的“α+β”折叠模式，无跨膜结构及信号肽。构建 cbs 基因表达载体（pGEX- cbs ）以表达重组蛋白，结果显示， cbs 基因在大肠杆菌BL21中高效表达，可表达出分子质量约为66.4 ku的融合蛋白。对表达条件进行优化，发现在37℃、IPTG浓度0.6 mmol/L的条件下诱导5 h后，CBS蛋白的表达量较多，该蛋白主要以包涵体形式存在。