A Screen for novel factors involved in pluripotency and X-chromosome reactivation

Un ejemplo clasico de la regulacion epigenetica del genoma es la Inactivacion del Cromosoma X (XCI) en los mamiferos femeninos, donde uno de los dos cromosomas X esta inactivado para la compensacion de dosis entre los sexos. Sin embargo, la XCI se revierte durante el desarrollo de los mamiferos mediante la reactivacion del cromosoma X inactivo (XCR) en el linaje de las celulas epiblasticas en la masa celular interna del blastocisto tardio y en las celulas germinales, acoplando asi la XCR con la pluripotencia. Para estudiar la XCR se utilizo la reprogramacion de celulas madre pluripotentes inducidas (iPSC), que recapitula la XCR in vitro. Se realizo un cribaje reduciendo la expresion de genes candidatos, seleccionados a partir de un microarray de expresion en blastocitos. Este ensayo permitio identificar factores cuya expresion reducida tiene un efecto tanto en la adquisicion de la pluripotencia como en la XCR. Sin embargo, tambien se identificaron factores con un rol especifico en la XCR. Esto sugiere que la XCR no es un requisito absoluto para la reprogramacion de las iPSC, y que los dos procesos se pueden desacoplar. Se identifico el miembro Smc1a del complejo de cohesina. Mediante microscopia de super resolucion (STORM) se observo un enriquecimiento preferencial de Smc1a en el cromosoma X activo en comparacion con el X inactivo, lo que sugiere un papel en la configuracion de la estructura del X activo. Por lo tanto, concluimos que los cambios mediados por cohesina en la estructura del cromosoma X son un paso clave durante el proceso de reactivacion del X.