Le test de troncation des protéines (PTT) : un outil pour la détection de mutations dans l'ADN.

La detection de mutations dans l'ADN represente une etape essentielle de la biologie moleculaire, pour la recherche fondamentale comme pour les applications medicales. Les strategies actuellement disponibles pour deceler les alleles mutes sont fondees, soit sur l'utilisation de methodes rapides mais limitees a l'identification d'un nombre restreint de mutants determines, soit sur l'utilisation de techniques couteuses et laborieuses mais capables de deceler la moindre alteration de sequence dans les portions essentielles des genes. La detections de mutations est une demarche complexe et aucune des methodes disponibles n'est applicable seule a toutes les situations, leur choix dependant de nombreux criteres (nature des mutations, taille et structures du gene, acces a l'ARNm, degres d'efficacite et de sensibilite recherches). Nous presentons les avantages relatifs d'une strategie de recherche specifique des mutations qui introduisent un signal d'arret premature de la synthese proteique, fondee sur le test de troncation des proteines (PTT), par rapport aux techniques classiques de balayage d'un fragment d'ADN ou d'ARN telles que l'electrophores en gel de gradient denaturant (DGGE), l'analyse d'heteroduplex (HA), l'analyse de conformation de l'ADN en simple brin (SSCA) ou le clivage chimique ou enzymatique de mesappariements (CCM/EMC). Le PTT, fonde sur l'analyse de fragments d'ARN ou d'ADN transcrits et traduits in vitro, parait etre, pour certaines maladies genetiques, la facon la plus efficace et la moins couteuse de deceler les mutations de l'ADN responsables de troncation proteique.