双酚A与苯并[α]芘联合作用对三种乳腺上皮细胞的DNA损伤效应

[目的]观察双酚A（BPA）与苯并[α]芘（BaP）联合作用对三种乳腺上皮细胞DNA损伤的影响。[方法]采用对DNA双链断裂标志pH2AX免疫荧光检测的方法，观察环境相关剂量水平（10^-9，10^-7mol／L）BPA、10^-9mol／L17—β-雌二醇（雌激素对照）及其与10^-6mol／LBaP联合作用对人乳腺上皮细胞（HMEC）、人永生化乳腺上皮细胞MCF-10A（CRL-10317）和人乳腺上皮肿瘤细胞MCF-7三种乳腺上皮细胞的DNA损伤效应（以二甲基亚砜作为溶剂对照），并应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测三种细胞雌激素受体α和雌激素受体β的基因ESR1、ESR2mRNA水平的相对表达量。[结果]BPA对三种类型乳腺上皮细胞pH2AX阳性率均无明显影响。BaP可明显增加HMEC和MCF-7两种乳腺上皮细胞pH2AX阳性率：单独染毒时两种细胞pH2AX阳性率分别由（34．7±2．2）％和（3．1±0.3）％增至（63．6±1．2）％和（13.3±0．4）％；与10^-7mol／LBPA、10^-9mol／L17-β-雌二醇分别联合作用可使MCF-7的pH2AX阳性率增至（15．1±0．2）％、（17．5±1．0）％，与单独染毒组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。三种细胞内ESR1、ESR2基因表达有差异，其中ESRl基因表达差异明显，在MCF-7中的表达水平最高，为HMEC的1080倍、MCF-10A的5222倍。[结论]BPA与BaP联合作用与BaP单独作用相比，可引起MCF-7的DNA双链断裂损伤加剧，该作用可能与雌激素受体表达水平相关。