Desenvolvimento in vitro de Bradyrhizobium japonicum SEMIA 5079 em diferentes condições de pH e fontes de carbono

Bradyrhizobium e um genero de bacterias fixadoras de nitrogenio amplamente utilizados em culturas agronomicas anuais. Em algumas especies desse genero, tem-se identificado tolerância a solos acidos. Contudo, poucos estudos in vitro tem sido desenvolvidos para a caracterizacao dos mecanismos fisiologicos e geneticos de tolerância. Dessa forma, a determinacao de condicoes otimas de cultivo in vitro , relacionadas ao pH do meio e a fonte de carbono sao necessarios, visando o desenvolvimento de protocolos laboratoriais eficientes e de custo reduzido. O objetivo deste trabalho foi avaliar o crescimento in vitro de Bradyrhizobium japonicum SEMIA 5079 em meio liquido utilizando tres diferentes fontes de carbono e duas diferentes condicoes de pH. Colonias de B. japonicum SEMIA 5079 foram cultivadas a temperatura de 30°C, em pH 5,5 ou pH 7,0 em 150 mL de meio de cultura contendo extrato de levedura e Manitol (meio YMAN), Sacarose (meio YSAC) ou Dextrose (meio YDEX) como fonte de carbono. O crescimento bacteriano foi avaliado apos 0, 24 e 48 horas de cultivo, atraves da determinacao da densidade otica em espectrofotometria (OD 560 nm). Todos os experimentos foram realizados em triplicata e as diferencas entre as medias calculadas usando o test- t de Student.  Comparando todas as combinacoes de pH e fonte de carbono, B. japonicum SEMIA 5079 apresentou maior crescimento em meio YMAN e pH 7,0 apos 0 e 12 horas. Contudo, apos 24 horas o crescimento em meio YMAN e pH 5,5 foi maior que em pH 7,0 ( p = 0.14). O segundo maior crescimento foi observado em meio YSAC/pH 7,0, enquanto em pH 5,5, as culturas nesse meio apresentaram o menor crescimento. Em meio YDEX/pH 5,5, B. japonicum SEMIA 5079 apresentou crescimento equivalente a YSAC pH 7,0 apos 0 e 24 horas, apresentando um marcante decrescimo apos 48 horas. Esses resultados sugerem que manitol e a melhor fonte de carbono para o cultivo in vitro de B. japonicum SEMIA 5079. Alem disso, essa cepa possui alto potencial de crescimento em meio acido, apresentando consideravel crescimento apos 48 horas em pH 5.5, sendo indicada para estudos relacionados a cultivo em solos acidos.