AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE DA CURCUMINA ASSOCIADA À CISPLATINA EM LINHAGEM DE CARCINOMA DE PULMÃO NCI-H460

O câncer de pulmao e um dos mais agressivos com uma razao mortalidade/incidencia de, aproximadamente, 90%. Entre os subtipos de câncer de pulmao, o carcinoma de pulmao de nao-pequenas celulas (CPNPC) constitui mais de 80% de todos os casos. A cisplatina, ou cis-diaminodicloroplatina (II) (CDDP), e o agente quimioterapico mais utilizado no tratamento do CPNPC, porem o seu uso clinico esta limitado ao seu efeito toxico, alem do desenvolvimento de quimiorresistencia. Diante disso, a identificacao de novos alvos terapeuticos se faz necessaria. A terapia adjuvante com curcumina (CUR), componente do extrato de Curcuma longa L., tem apresentado resultados promissores, visto que estudos apontam que esse fitoquimico possui efeitos anti-cancerigenos, anti-inflamatorios e antioxidantes. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da CUR na viabilidade celular associada, ou nao, com CDDP em linhagem celular de CPNPC. Para isso, foi utilizada a linhagem celular de CPNPC humano NCI-H460 , mantida em meio de cultura DMEM suplementado com 10% de soro bovino fetal inativado a 37oC, em atmosfera umida, contendo 5% de CO 2. A citotoxicidade aguda foi avaliada atraves do ensaio colorimetrico de sulforodamina B (SRB), no qual as celulas foram submetidas aos tratamentos com CUR e CDDP isoladas na forma de pre-tratamentos (CUR seguido de CDDP e CDDP seguido de CUR e co-tratamentos (CUR e CDDP simultâneos) em concentracoes variando de 0 - 100 µM por 48 h. O efeito na proliferacao em um periodo mais prolongado foi avaliado pelo ensaio clonogenico, no qual as celulas foram expostas aos mesmos tratamentos com concentracoes de 0 - 50 µM por 48 h. A seguir, as celulas foram plaqueadas e avaliadas por 7 dias em meio de cultura sem os tratamentos. Ensaios de migracao celular estao em andamento. Na caracterizacao do efeito agudo, foi observado que a CUR isolada afeta a viabilidade celular, apresentando uma dose cerca de 3 vezes maior do que a CDDP isolada, sugerindo uma menor sensibilidade das celulas a CUR. Por outro lado, o pre-tratamento com CUR, seguido de CDDP, aumentou o IC₅₀ da CDDP, mostrando que a CUR reduz o dano induzido por CDDP. Na avaliacao do efeito tardio, a CDDP isolada, quando comparado ao controle nao tratado, reduziu a fracao de sobrevivencia em todas as doses utilizadas. No tratamento com CUR isolada, essa reducao se deu a partir da dose de 25 µM, e o pre-tratamento com CDDP seguido de CUR, reduziu a fracao de sobrevivencia em aproximadamente 80%. Portanto, atraves dos experimentos realizados, concluimos que a CUR possui efeito citotoxico na linhagem celular de CPNPC NCI-H460 em doses maiores que a CDDP. Por outro lado, na forma de pre-tratamento agudo (CDDP seguido de CUR), a CUR reduz o efeito da CDDP, indicando uma acao protetora aos danos causados pela CDDP. Alem disso, esse tratamento tambem apresenta efeito a longo prazo, evidenciando que os danos agudos causados pela CDDP sao reparados pela CUR.